Bosch PPS8 C2 Series Manuel d'utilisateur Page 46

  • Télécharger
  • Ajouter à mon manuel
  • Imprimer
  • Page
    / 153
  • Table des matières
  • MARQUE LIVRES
  • Noté. / 5. Basé sur avis des utilisateurs
Vue de la page 45
2. ERGEBNISSE 45
2.1.2.1 Durchmusterung verschiedener mit pPICZαA_ROL transformierter Klone auf ihre
Fähigkeit ROL zu produzieren
Die selektierten Zeocin-resistenten Kolonien wurden auf die TMM-Platten transferiert. Nach
24 h Inkubation bei 30 °C wurde zur Induktion der Lipaseproduktion ein Tropfen Methanol in
den Deckel der Petrischale gegeben. Nach 2-3 Tagen, wobei alle 24 h wieder ein Tropfen
Methanol zugegeben wurde, bildete sich um die Kolonien unterschiedlich große Höfe von
denen jene, welche die größten Höfe zeigten, ausgewählt und in 50 ml BMGY Medium
überimpft wurden. Nach dem Erreichen einer OD
600
von 2-6 wurden die Zellen abzentri-
fugiert und in derselben Menge BMMY Medium resuspendiert. Das im Medium enthaltene
Methanol induzierte die Lipaseexpression. Nach 48 Stunden wurde die Lipaseaktivität im
Überstand der einzelnen Kulturen bestimmt.
Abbildung 2.3: Relative Lipaseaktivität einzelner Pichia pastoris GS115 Klone
transformiert mit pPICZαA_ROL.
Die Werte wurden auf eine OD
600
= 15 bezogen.
Beim Überimpfen der Kolonien blieben eine unterschiedliche Menge der Zellen an der
Impföse hängen. So wurde, um die Aktivität vergleichen zu können, angenommen, daß die
0
20
40
60
80
100
120
1 1718192223
Klone
Vue de la page 45
1 2 ... 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 ... 152 153

Commentaires sur ces manuels

Pas de commentaire